Rol de la Hormona Concentradora de Melanina (MCH) en el núcleo mediano del rafe: estudio comportamental y electrofisiológico.

Antecedentes y fundamentoLa hormona concentradora de melanina (MCH) es un neuropéptido utilizado como neurotransmisor por neuronas localizadas en el hipotálamo postero-lateral y zona incerta. Estas neuronas proyectan a diversas regiones del sistema nervioso central, el núcleo mediano del rafe (MnR) se destaca por recibir una gran densidad de fibras MCHérgicas. También se ha sugerido que la MCH regularía la actividad neuronal del MnR por una vía neuro-humoral, a través del líquido cefalorraquídeo (LCR). El MnR está compuesto principalmente por neuronas serotoninérgicas. Estas neuronas están involucradas en el control del sueño REM (SREM) y se han relacionado con la fisiopatología del trastorno depresivo mayor (TDM). Dado estos antecedentes, es nuestra hipótesis de trabajo que las neuronas MCHérgicas hipotalámicas participan regulando las neuronas serotoninérgicas del MnR tanto por una vía neural como neuro-humoral, participando así en la fisiología del SREM y la fisiopatología del TDM. Objetivos y metodologíaSe plantea estudiar el rol del sistema MCHérgico a nivel del MnR. Los objetivos específicos son:Objetivo 1. Estudiar los efectos sobre el sueño y la vigilia de la aplicación de MCH en el MnR. En ratas previamente implantadas para registro polisomnográfico y con cánulas implantadas para microinyecciones intracerebrales en el MnR, se realizarán microinyecciones locales de MCH y vehículo. Se analizará el tiempo que los animales se mantienen en el estado de vigilia, sueño lento y SREM, así como la latencia a los diferentes estados comportamentales. Objetivo 2. Estudiar los efectos en modelos conductuales para la evaluación de antidepresivos de la aplicación de MCH en el MnR. En ratas previamente implantadas con cánulas para inyecciones intracerebrales, se analizarán los efectos conductuales de la administración intra-MnR de MCH, utilizando la prueba de nado forzado y la prueba de campo abierto. Se evaluarán el tiempo de inmovilidad, escalamiento y nado.Objetivo 3. Estudiar los efectos de la aplicación de MCH y antagonistas sobre la actividad de neuronas del MnR. Se realizarán registros extracelulares en neuronas del MnR, en ratas anestesiadas con uretano. Mediante micropipetas múltiples acopladas al electrodo de registro se aplicará MCH en forma para-celular, así como también intraventricular. La frecuencia y el patrón de descarga neuronal serán analizados antes y después de la aplicación de MCH. A su vez se registrará la respuesta neuronal del MnR a la estimulación eléctrica del hipotálamo postero-lateral, donde se encuentran las neuronas MCHérgicas. Posteriormente se marcará la neurona registrada (utilizando Neurobiotina) y se identificará mediante inmunohistoquímica su neurotransmisor (serotonina o GABA). Resultados esperadosSe espera que la MCH produzca un aumento del SREM y disminución de su latencia. Esperamos que la inyección de MCH en el MnR produzca un efecto pro-depresivo. En los estudios a nivel celular, se espera que la MCH tenga un efecto inhibitorio sobre las neuronas serotoninérgicas, estudios preliminares sugieren este resultado.