ROL ANTIINFLAMATORIO DEL AANO2 EN CÉLULAS DEL SISTEMA INMUNE: MODULACIÓN DE LA ACTIVACIÓN DE MACRÓFAGOS Y NEUTRÓFILOS

Las células fagocíticas constituyen actores clave en las respuestas inflamatorias. Estas respuestas, asociadas a la activación de células (por ej. macrófagos y neutrófilos), involucran la formación y liberación de gránulos intracelulares, secreción de citoquinas pro-inflamatorias así como la producción de una variedad de especies reactivas consecuencia del aumento de la expresión y actividad de enzimas inducibles. El desarrollo de un compuesto capaz de modular la respuesta inflamatoria es de vital importancia ya que la inflamación es la base de diversas enfermedades, como por ejemplo la aterosclerosis y la diabetes. Hemos demostrado anteriormente que la nitración del ácido araquidónico conduce a la formación de nitroaraquidónico (AANO2), que ejerce acciones anti-inflamatorias como la regulación negativa de la expresión de la óxido nítrico sintasa-2 (NOS2), inhibición irreversible las isoformas -1 y -2 de la PGHS y la inhibición de la secreción de citoquinas pro-inflamatorias en los macrófagos activados. Nuestra hipótesis es que el AANO2 puede ser un modulador de la respuesta efectora de células fagocíticas. Se plantea como objetivo de este proyecto elucidar los mecanismos de acción antiinflamatorios del AANO2 en células del sistema inmune (macrófagos y neutrófilos), mediante el análisis y estudio de las enzimas y vías de señalización intracelular involucradas en los procesos inflamatorios. Para ello se analizará de los efectos del AANO2 sobre funcionalidad así como sobre la expresión y activación de enzimas inducibles (HO-1, NOX2, NOS2), donde esperamos que la actividad y/o expresión de las enzimas asociadas a la inflamación (NOX2 y NOS2) estén disminuidas concomitante al aumento de la actividad y/o expresión de las enzimas resolutivas de la inflamación (HO-1). También se estudiarán las vías de señalización intracelular involucradas en los efectos del AANO2 que generan un fenotipo menos inflamatorio en macrófagos y neutrófilos: se estudiará la capacidad del AANO2 de modular de forma negativa las vías asociadas a respuestas proinflamatorias (PKC y NF-kB) y de forma positiva las que involucran la HO-1 (Nrf2). Más allá de los estudios generados en cultivos celulares que se van a realizar, es importante que se relacionen con estudios in vivo del efecto del AANO2. La capacidad de modular un proceso inflamatorio in vivo por parte del AANO2 es de suma importancia para la potencial utilización farmacológica de los derivados nitrados del AA. Para ello, nuestro grupo de investigación cuenta con un modelo de inflamación poliarticular sistémica en ratas, donde evaluaremos la confirmación de los efectos observados in vitro, disminuyendo el estrés oxidativo y mejorando la enfermedad en los animales tratados con AANO2. De esta forma, en este proyecto intenta mostrar al AANO2 como un potencial fármaco antiinflamatorio.