Selección de anticuerpos de llama con alta afinidad por moléculas de co-estimulación de células T para el desarrollo de vacunas de nueva generación y estrategias de inmunoterapia eficaces.

Las vacunas de ADN y las basadas en vectores virales constituyen un nuevo diseño de vacunas que resultan particularmente eficientes para obtener una respuesta de células T CD8+ protectora. Esto es así debido a que, al vehiculizar el gen del antígeno en cuestión al núcleo celular, se logra la presentación del mismo en moléculas de MHCI, requisito indispensable para la activación de linfocitos T CD8+. Esta estrategia de inmunización surge como una opción atractiva para algunas enfermedades para las cuales no se han podido desarrollar vacunas eficientes con los diseños de vacunas clásicos, como el sida, la malaria y la tuberculosis. Aunque estas aproximaciones han logrado incrementar el porcentaje de individuos protegidos en comparación con las aproximaciones clásicas, las respuestas de células T CD8+ obtenidas aún no alcanzan la potencia esperada. Este es el principal problema que busca abordar el presente proyecto. La activación de la célula T requiere, además del reconocimiento molecular entre el complejo MHC-antígeno y su TCR, de un conjunto adicional de interacciones entre proteínas de membrana, y de éstas con factores solubles. Estudios recientes sugieren que la co-administración de vectores virales (codificantes para un antígeno de interés), con agentes agonistas de receptores co-estimuladores de células T, así como con agentes antagonistas de receptores co-inhibidores de dichas células (o sus ligandos), podría ayudar a incrementar la respuesta de células T CD8+ memoria contra el antígeno. Este proyecto propone generar estos agentes agonistas/antagonistas utilizando anticuerpos de llama monodominio (sdAbs), de modo que estén disponibles para su futura utilización en el diseño de nuevas vacunas. Los sdAbs son especialmente atractivos dada su versatilidad para ser clonados, producidos en grandes cantidades y por su capacidad de penetración en tejidos. Por ello, proponemos utilizar la tecnología de phage display para generar bibliotecas de sdAbs de llama contra algunos receptores de co-estimulación (OX40 y DR3) y co-inhibición (PD1, y CTLA-4) de células T y del ligando PDL-1, con el fin de seleccionar aquellos de alta afinidad, y con actividad biológica relevante. Para la realización de estas actividades, se cuenta con: a) la experiencia del grupo de Inmunoquímica que ya ha generado y seleccionado bibliotecas de sdAbs, b) la colaboración de veterinarios del parque Lecocq que realizarán la manipulación de los animales, c) el apoyo de grupos del exterior de vasta trayectoria en áreas de la inmunología que nos proveerán de los receptores (o ligandos) purificados, y/o sus cADNs, y d) la experiencia de la postulante que en la manipulación de vectores virales de terapia génica y en inmunoterapia contra el cáncer.