EVALUACIÓN DE LAS CARACTERÍSTICAS IN VITRO DE LAS CÉLULAS MADRE MESENQUIMALES EXTRAÍDAS DE TEJIDO ADIPOSO EN FELINOS.

Las células madre mesenquimales (CMM) son una temática actual y poseen características de interés terapéutico como multipotencialidad, poder inmunomodulador, promoción de angiogénesis, migración al foco inflamatorio y poder antimicrobiano. Las más estudiadas y utilizadas en ensayos y en tratamientos experimentales en especies domésticas son las CMM derivadas de tejido adiposo. Recientemente Uruguay ha comenzado el estudio de esta tipo celular en felinos con perspectivas de utilización terapéutica. Ademas del tejido adiposo y la médula ósea, las CMM pueden obtenerse de la pulpa dental, incluso de tejido dental inflamado, lo cual representa una fuente alternativa de CMM de la que existe muy poca información de su utilización en especies veterinarias. El objetivo de este estudio es evaluar las características in vitro y estabilidad citogenética de dos fuentes de células madre felinas: las derivadas de tejido adiposo y de pulpa dental. Para ello se estudiarán en ambas fuentes, la capacidad de formación de colonias fibroblásticas y capacidad de proliferación in vitro mediante ensayo colorimétrico. Se estudiará en distintos pasajes la pluripotencialidad de las mismas mediante la detección de marcadores Sox, Nanog y Oct4 mediante qRT-PCR. Se evaluará la tridiferenciación in vitro como caracterización de células CMM y se medirá la expresión génica de marcadores de osteogénesis osteocalcina, RUNX2,odontogénicos BSP, DSPP, de adipogénesis PPARy, ADPQ y condrogénesis COL1A2, ACAM y determinación de factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF), para evaluar capacidad angiogénica en ambas fuentes mediante RT-qPCR. Se realizarán estudios citogenéticas en sucesivos pasajes celulares in vitro de ambas fuentes en busca de posibles alteraciones cromosómicas numéricas o estructurales que puedan comprometer su utilización terapéutica in vivo. Los resultados obtenidos podrán generar información de utilidad tanto para medicina veterinaria como humana.