Restricción alimenticia en ovinos: respuesta endócrino-metabólica y funcionalidad uterina en ovejas en gestación temprana con diferentes reservas corporales

El objetivo de este trabajo es estudiar la respuesta metabólica (en términos de metabolitos, hormonas y expresión génica) y la funcionalidad uterina (expresión génica, presencia y localización de proteínas e identificación de las proteínas) a una restricción alimenticia en ovejas durante la gestación temprana, con diferente grado de reservas (en términos de condición corporal) al inicio del experimento. Para ello se establecieron cuatro grupos: ovejas con alta CCi control (AC, n = 6), ovejas con alta CCi subnutridas (AS, n = 7), ovejas con baja CCi control (BC, n = 9) y ovejas con baja CCi subnutridas (BS, n = 7). Se estudiará la expresión génica por PCR en tiempo real en el hígado de: GHR, GHR1-A, IGF-I, IGFBPs, IR, LEPR, ADIPOR1 y ADIPOR2 y en el tejido adiposo de: leptina, LEPR, ADIPOR1, ADIPOR2, IR, GHR, IGF-1. A su vez, en útero, se estudiarán las concentraciones de ARNm de GHR, IGF-I, IGF-II, IGFBPs, ADIPOR1 y ADIPOR2, LEPR, ER y PR por PCR en tiempo real. Además, la localización de proteínas en el útero (ERα y PR endometriales y de IGF-I e IGF-II) se estudiará mediante inmunohistoquímica, y estimaremos su abundancia y localización por tipo celular (epitelio luminal, epitelio glandular superficial y profundo, estroma superficial y profundo) a través de un análisis de imagen. Se estudiarán las proteínas uterinas por electroforesis bidimensional (IEF-SDS PAGE) y espectofotometría de masa. Todas las variables serán analizadas por ANOVA utilizando un procedimiento mixto incluyendo en el modelo la CC inicial, el tratamiento nutricional, el tipo celular (en el caso que corresponda) y la interacción entre ambos.