Estudio de la participación de la proteína Ptr en la regulación del número y migración de los macrófagos de Drosophila.

Los macrófagos son células pertenecientes al sistema inmune innato, con capacidad migratoria, secretoria y fagocítica. Su actividad resulta esencial para la remoción de microorganismos, células tumorales y células apoptóticas. Secretan componentes de la matriz extracelular y péptidos antimicrobianos y están presentes en organismos de toda la escala zoológica. Grandes avances en el conocimiento sobre el desarrollo de los macrófagos se consiguieron estudiando varios modelos animales, entre los cuales se destaca la mosca Drosophila melanogaster. Como organismo experimental para el estudio del desarrollo de los macrófagos, Drosophila presenta como ventajas la posibilidad de estudiar su migración in vivo y las múltiples oportunidades experimentales que ofrece el sistema bipartito UAS-Gal4, por medio del cual se pueden expresar o silenciar genes específicamente en las células a estudiar. En el embrión de Drosophila, los macrófagos se originan en el mesodermo de la cabeza y se desplazan por vías migratorias bien definidas hasta distribuirse por todo el embrión. Una de las vías de señalización importantes para la proliferación, diferenciación y migración de distintas células en seres humanos y otras especies es la vía Hedgehog, originalmente caracterizada en Drosophila. Recientemente, nuestro grupo de trabajo generó herramientas para el estudio de Patched-related (Ptr), gen que codifica una proteína de transmembrana con el mismo nombre y que integraría esa vía. Entre otras herramientas, generamos líneas mutantes que no expresan Ptr (líneas knockout) o que lo expresan de forma reducida por silenciamiento de su ARN mensajero y anticuerpos específicos con los cuales determinamos que la proteína Ptr se localiza en los macrófagos del embrión. Estudios preliminares utilizando la línea knockout determinaron que la ausencia de Ptr es letal y sugirieron que la misma afecta de forma negativa el número de los macrófagos y su migración. Por otra parte, la alta similitud estructural que presenta Ptr en relación a Patched (el receptor canónico de la vía de Hedgehog), la posibilidad de unir Hedgehog in vitro y la alteración del patrón de dentículos en embriones en los cuales silenciamos la expresión de Ptr, nos indujeron a investigar si Ptr contribuye al control de la proliferación, diferenciación y migración de los macrófagos actuando en la vía de Hedgehog. El objetivo del presente proyecto es profundizar y avanzar en estos estudios, buscando confirmar las alteraciones observadas en el mutante knockout de Ptr, discriminar sus causas e investigar si Ptr contribuye normalmente al control de proliferación, diferenciación y migración de los macrófagos participando en la vía Hedgehog. Dado los múltiples aspectos conservados que existen entre insectos y humanos en relación al sistema inmune innato, resulta plausible pensar que los resultados obtenidos permitirán una mayor compresión de la función de estas células con potencial aplicación en el área de la biomedicina.